期刊简介
本刊宗旨是防止传染病的传入传出，保护人体健康，为维护口岸食品安全促进国际贸易与友好往来，发展社会主义经济服务。
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首页>中国国境卫生检疫杂志
- 杂志名称：中国国境卫生检疫杂志
- 主管单位：国境卫生检疫
- 主办单位：国家质量监督检验检疫总局
- 国际刊号：1004-9770
- 国内刊号：11-3254/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会优秀期刊进步奖（00）期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
基于颜色判定的RT-LAMP技术检测HCoV-OC43冠状病毒
耿合员；汪圣强；吴海磊；易海华；于九洋；孙悦；邢琛；丁均；秋雯；曹晓蕴
关键词：人冠状病毒, 逆转录环介导等温扩增, 可视化检测
摘要：目的 建立基于颜色判定的适用于国境口岸简便、快速、灵敏和特异的逆转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法检测人冠状病毒OC43(HCoV-OC43)核酸.方法 通过序列比对,选择HCoV-OC43(GenBank号:KU131570)为参考株,根据其核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白基因保守区序列设计6条特异性引物,在65℃等温条件下扩增45 min.在扩增前加入钙黄绿素作为反应指示剂,以终反应颜色变化作为结果判断标准.对病毒核酸依次倍比稀释以检验该方法的灵敏性;同时,对甲型、乙型流感病毒和其他HCoV进行检测,以检验该方法的特异性.结果 通过引物筛选终选定了1组特异性引物,仅能与HCoV-OC43病毒核酸产生特异性反应并出现颜色改变,而与其他病毒均不能产生颜色变化,具有较高的特异性.与常规荧光定量RT-PCR法相比,该方法检测灵敏度达5.6拷贝/反应,灵敏度更高,且在短时间内达到对HCoV-OC43基因快速检测的目的.结论 建立的基于颜色判定的RT-LAMP方法可实现对HCoV-OC43病毒快速、灵敏、特异性检测,具有在国境口岸以及基层医疗机构和疫区现场推广应用的潜力.
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