期刊简介

本刊宗旨是防止传染病的传入传出,保护人体健康,为维护口岸食品安全促进国际贸易与友好往来,发展社会主义经济服务。

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  • 杂志名称:中国国境卫生检疫杂志
  • 主管单位:国境卫生检疫
  • 主办单位:国家质量监督检验检疫总局
  • 国际刊号:1004-9770
  • 国内刊号:11-3254/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中华预防医学会优秀期刊进步奖(00)期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
中国国境卫生检疫杂志2017年第06期

中东呼吸综合征冠状病毒重组酶介导核酸检测方法的建立

周冬根;罗洁;许锡光;俞雪均

关键词:中东呼吸综合征冠状病毒, 重组酶介导, 假病毒颗粒
摘要:目的 建立快速、敏感、特异的逆转录重组酶介导(Reverse-transcription recombinase-aid assay,RT-RAA)核酸检测方法,用于中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)的检测.方法 根据MERS-CoV基因的保守序列设计并合成特异性RAA引物及探针.通过条件优化,以10倍系列稀释经第3代慢病毒载体构建的假病毒颗粒阳性标准品为模板,进行RT-RAA扩增,并进行特异性、敏感性以及临床样本检测.结果 建立的RT-RAA方法检测MERS-CoV假病毒颗粒阳性标准品的灵敏度为10拷贝/ml,高于实时荧光RT-PCR方法(102拷贝/ml);用该方法检测MERS-CoV假病毒颗粒有明显扩增,而甲型H1N1流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒等4种呼吸道病毒的检测均为阴性;检测我国首例输入性MERS病例的临床样本及1例英国QCMD协会的室间质评阳性灭活样本均能检出,与实际结果相符.检测时间(20 min)大大低于实时荧光RT-PCR (90 min).结论 建立的MERS-CoV RT-RAA检测方法灵敏、特异、快速,可用于MERS-CoV感染的现场快速检测和流行病学调查.