期刊简介

本刊宗旨是防止传染病的传入传出,保护人体健康,为维护口岸食品安全促进国际贸易与友好往来,发展社会主义经济服务。

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  • 杂志名称:中国国境卫生检疫杂志
  • 主管单位:国境卫生检疫
  • 主办单位:国家质量监督检验检疫总局
  • 国际刊号:1004-9770
  • 国内刊号:11-3254/R
  • 出版周期:双月刊
期刊荣誉:中华预防医学会优秀期刊进步奖(00)期刊收录:国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
中国国境卫生检疫杂志2014年第03期

人冠状病毒HCoV-HKU1和HCoV-NL63双重实时荧光RT-PCR检测方法的研究

刘胜牙;朱玉兰;张树平;谢聪贤;甄胜西;李微

关键词:人冠状病毒HKU1, 人冠状病毒NL63, 双重实时荧光PCR, 检测, 研究
摘要:目的 建立一种快速、灵敏、高效的人冠状病毒HKU1 (HCoV-HKU1)和NL63 (HCoV-NL63)双重实时荧光RT-PCR检测方法.方法 根据GENBANK数据库中HCoV-HKU1和HCoV-NL63的基因序列,利用BIOEDIT5.0软件进行序列比对分析,选择基因组的保守序列,并借助引物设计生物信息学软件,设计筛选出一套针对HCoV-HKU1和HCoV-NL63双重实时荧光PCR扩增的引物.从特异性、低检测限、重复性等方面进行评估,建立了HCoV-HKU1和HCoV-NL63双重实时荧光PCR检测方法.结果 分别以HCoV-HKU1和HCoV-NL63质粒为模板,HCoV-HKU1和HCoV-NL63双重实时荧光PCR方法的低检测量分别为4.96×102 copies/ml和4.96×102 copies/ml.该方法针对其他病原微生物及人类基因组无反应信号,特异性好.4个梯度稀释质粒样本的4次重复检测Ct值变异系数均<5%,重复性好.结论 HCoV-HKU1和HCoV-NL63双重实时荧光RT-PCR方法准确性好、灵敏度高、稳定性好,在临床鉴别诊断和口岸冠状病毒的监测中具有很好的应用前景.