期刊简介
本刊宗旨是防止传染病的传入传出，保护人体健康，为维护口岸食品安全促进国际贸易与友好往来，发展社会主义经济服务。
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首页>中国国境卫生检疫杂志
- 杂志名称：中国国境卫生检疫杂志
- 主管单位：国境卫生检疫
- 主办单位：国家质量监督检验检疫总局
- 国际刊号：1004-9770
- 国内刊号：11-3254/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会优秀期刊进步奖（00）期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
前纳豆激酶原基因化学诱导型表达载体的构建及鉴定
郭文秀；孙志；云华；陈宇飞
关键词：前纳豆激酶原基因, 纳豆激酶, 克隆, 表达, 纤溶作用
摘要：目的 克隆前纳豆激酶原基因,实现其在大肠杆菌中的表达,并对其表达条件进行研究.方法 从枯草芽孢杆菌中分离纯化基因组DNA作为模板,通过PCR扩增前纳豆激酶原基因,将其克隆到质粒pUC19中,构建重组克隆质粒pNK并转化大肠杆菌DH5α;将目的基因片段与表达载体pET30a连接,构建重组表达质粒pENK,转化大肠杆菌BL21(DE3),对其表达条件进行研究.结果 序列检测结果表明,所克隆片段全长1 152bp,与Genbank中已报道序列相比较,同源性达到100％.转化菌pENK108-BL21(DE3)经IPTG诱导表达目的产物,SDS-PAGE检测结果显示具特异条带,Western Blotting检测结果表明,表达产物确系目的融合蛋白.转化菌pENK108-BL21(DE3)在LB培养基中经37℃培养,1mmol/L IPTG诱导4h后,目的产物表达量达到大,约占菌体总蛋白的31％.时间凝块法显示表达物具有一定的纤溶作用.结论 成功构建前纳豆激酶原基因化学诱导型表达载体,并对转化菌的表达条件进行了研究.
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