期刊简介
本刊宗旨是防止传染病的传入传出，保护人体健康，为维护口岸食品安全促进国际贸易与友好往来，发展社会主义经济服务。
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首页>中国国境卫生检疫杂志
- 杂志名称：中国国境卫生检疫杂志
- 主管单位：国境卫生检疫
- 主办单位：国家质量监督检验检疫总局
- 国际刊号：1004-9770
- 国内刊号：11-3254/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会优秀期刊进步奖（00）期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
梅毒螺旋体Tp0453和TpN47抗原的制备及应用
朱玉兰；黄宗炎；刘胜牙；王佃鹏；叶健忠；张登峰
关键词：梅毒螺旋体, 表达, Ni2+亲和纯化, 双抗原夹心, 纯化, 应用
摘要：目的 表达纯化梅毒螺旋体Tp0453和TpN47蛋白,评价2种蛋白的检测效果,并建立一种新的梅毒抗体检测方法.方法 以梅毒螺旋体Nichols菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增Tp0453和TpN47蛋白基因,构建原核表达载体;转化表达菌株后经IPTG诱导表达,并优化表达条件,大规模培养后采用N2+亲和柱纯化目的 蛋白;纯化蛋白用过碘酸钠法进行HRP标记,采用双抗原夹心ELISA法分别评价两种蛋白的检测效果,在此基础上,按比例混合两种抗原,并建立双抗原夹心ELISA检测法.结果 构建了Tp0453和TpN47蛋白的原核表达载体,在低温(27℃)和低剂量IPTG(0.1 mmol/L)诱导条件下,有效的实现了Tp0453和TpN47蛋白的可溶性表达.采用Ni2+亲和纯化方法成功纯化出了高纯度的Tp0453和TpN47融合蛋白,ELISA检测结果显示Tp0453比TpN47具有更强的反应性,两种蛋白混合,建立的双抗原夹心ELISA检测法通过血清学试验表明具有很好的敏感度和特异性.结论 实现了梅毒螺旋体Tp0453和TpN47蛋白快速高效的表达,并结合2种抗原优势,建立了一种高效的梅毒双抗原夹心ELISA检测方法.
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