期刊简介
本刊宗旨是防止传染病的传入传出，保护人体健康，为维护口岸食品安全促进国际贸易与友好往来，发展社会主义经济服务。
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首页>中国国境卫生检疫杂志
- 杂志名称：中国国境卫生检疫杂志
- 主管单位：国境卫生检疫
- 主办单位：国家质量监督检验检疫总局
- 国际刊号：1004-9770
- 国内刊号：11-3254/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：中华预防医学会优秀期刊进步奖（00）期刊收录：国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中)
实时荧光PCR检测蜡样芽胞杆菌重组质粒标准的构建
田绿波；左浩江；陈肖潇；周倩；樊学军；吴志云；裴晓方
关键词：杆菌, 蜡样芽胞, TaqManTM探针, 重组质粒, 实时荧光定量PCR
摘要：[目的]构建蜡样芽胞杆菌16s-23sITS重组质粒,为实时荧光PCR检测蜡样芽胞杆菌提供质粒标准.[方法]选择蜡样芽胞杆菌16s一23sITS特异基因作为目的靶序列,设计、合成引物和探针,采用普通PCR扩增特异靶序列,克隆到pGM-T载体后,转化感受态大肠埃希菌DH5α,经蓝白斑筛选,再分别用EcoRI酶切,普通PCR及测序3种方法证实目的片段已成功重组.建立荧光定量PCR检测蜡样芽胞杆菌的标准曲线.[结果]成功构建目的重组质粒,并以此为标准制作荧光定量PCR标准曲线.重组质粒标准具有较大的线性范围(102copies/μl～108%opies/μl)和灵敏度.[结论]该方法构建的16s-23sITS基因重组质粒能满足实时荧光定量测定对参考标准的要求,为后续实时荧光PCR快速检测蜡样芽胞杆菌的推广应用提供了条件.
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